Респа 2021 прямые обратные праймеры


можете помочь с каждым пунктом ? можете обьяснить различие между прямым и обратным праймером

1 лайк

I. кДНК это типо ДНК копии мРНК. Она имеет такую же последовательность что и мРНК, только рнк нуклеотиды замененые на днк нуклеотиды. Если говорить о праймерах, то они определают направленность молекулы.


Если бы мы использовали обратный праймер то 5’ и 3’ концы были бы перевернуты у полученной кДНК, а еще последовательность была бы не идентичной мРНК, а комплементарной.

II. Так как на электрофорезе мы видим несколько разных длин кДНК, то можно предположить что они были получены с помощью альтернативного сплайсинга.

III. Самый длинный фрагмент на геле приблизительно равен 500bp, а это значение можно получить только если все пять экзонов захваченных двумя праймерами были бы в мРНК.

IV. Если бы делали ПЦР используя начальную ДНК, то все интроны были бы в составе. Выходит 3598bp.

2 лайка